Boletín Médico
Captura de Híbridos
Importancia de la detección temprana del Cáncer de Cuello Uterino y la determinación del grado de agresividad del Virus Papiloma Humano (VPH)
Hoy está establecido que el cáncer del cuello uterino se desarrolla de lesiones precursoras reconocidas como neoplasias intraepiteliales cervicales (NICs) o lesiones intraepiteliales escamosas (LIEs).1,2 Las lesiones intraepiteliales escamosas constituyen un grupo heterogéneo que pueden estar asociadas a diferentes tipos de Papiloma Virus Humano (PVH). Las llamadas LIEs de alto grado tienen un incrementado potencial de progresión y están usualmente asociadas a los virus del PVH de alto riesgo, que son los mismos que se encuentran en la mayoría de los carcinomas infiltrantes del cuello uterino.3 En contraste, las denominadas LIEs de bajo grado son heterogéneas en relación con su comportamiento clínico y asociadas a diferentes otros tipos de Papiloma Virus Humano.
Aproximadamente de la mitad a los dos tercios de las lesiones de LIEs de bajo grado se comportan como infecciones virales productivas no neoplásicas y frecuentemente regresionan espontáneamente, aun sin tratamiento.2 Las otras se comportan como verdaderas neoplasias y persisten o progresan a lesiones histológicas mayores.
De acuerdo a su importancia en relación con la génesis de cáncer cervical los Virus Papiloma Humano (VPH) se dividen en tres grupos de riesgo:
Virus de alto riesgo: 16, 18, 45, 56
Virus de bajo riesgo 6, 11, 42, 43, 44, 53, 54, 55
El diagnóstico citológico del cáncer uterino:
Como es bien sabido desde hace más de cuatro décadas la prueba de Papanicolaou se viene utilizando, exitosamente, para el reconocimiento de las lesiones cervicales precancerosas o iniciales.4 La prueba es tan significativa que en los países en donde se ha logrado someter a toda la población susceptible a un examen periódico, han disminuido, de manera importante, las tasas de morbilidad y mortalidad por esta enfermedad.5
Es, igualmente, bien sabido, que la comunidad científica ha logrado, con el objeto de prevenir el cáncer cervical, a través de esfuerzos de coordinación internacional, establecer criterios estandarizados para el manejo de las mujeres normales y de las portadoras de lesiones cervicales.6 Es así que a través de sucesivas conferencias, entre especialistas de ginecología, patología y citología, ha quedado sancionado el llamado Sistema de Bethesda. De ésta manera se ha adoptado un modelo común de diagnóstico citológico que permite comparaciones válidas entre los diversos países del mundo. Las conferencias persiguen, igualmente, buscar criterios homogéneos para el manejo de los pacientes y una mayor precisión diagnóstica, menores errores y una relación costo-beneficio en armonía con los requerimientos y posibilidades de las pacientes.
Enriquecimiento Citológico en Base Líquida:
Dos son los más importantes desarrollos ocurridos en los últimos años. El primero es la técnica de enriquecimiento citológico o método del extendido en base líquida. Básicamente este procedimiento consiste en recoger las células del cuello uterino utilizando no la espátula de madera, como se ha realizado corrientemente, sino un pequeño cepillo de plástico, especialmente diseñado, para colectar las células exfoliativas del cuello uterino y del canal endocervical. Mientras que la espátula de madera recoge una cantidad x de células, al extender el material sobre la lámina, sólo una fracción de ellas (se calcula un 20% de las células raspadas) quedan en el frotis para el estudio microscópico. En cambio, en la muestra tomada con el cepillo el 100% de las células recogidas quedan sumergidas en el líquido de enriquecimiento celular, obteniéndose una solución con todos los componentes existentes y así la representatividad celular en la lámina es mejor en cantidad y calidad.
Esto explica porqué con el extendido cervical en base líquida se incrementa la detección de anormalidades cervicales en un 31%, en relación con el método ordinario de Papanicolaou, se disminuyen los falsos negativos y el porcentaje de láminas inadecuadas.
La tecnología de la Captura Híbrida :
El otro importante desarrollo es la tecnología denominada de Captura de Híbridos (Hybrid Capture ® 2 de DIGENE) que permite identificar directamente los ácidos nucleicos del Papiloma Virus Humano (PVH).
Como hemos señalado, anteriormente, se requiere una persistente infección con virus de alto riesgo para la progresión de las neoplasias intraepiteliales cervicales a carcinoma "in situ" o carcinoma infiltrante. Se ha calculado que esta persistencia incrementa en 250 veces el riesgo de que una lesión escamosa intraepitelial progrese a un cáncer cervical. 7
La tecnología de Captura de Híbridos es un método cualitativo que consiste en la hibridización del DNA de la muestra a estudiar con sondas de RNA específicas para 18 tipos virales de alto y bajo riesgo. Estos híbridos DNA:RNA son capturados sobre una superficie con anticuerpos conjugados con material quimioluminiscente que emite señales de luz al reconocer el DNA del PVH. La figura 1 muestra los equipos requeridos para la prueba de captación quimioluminiscente, y la figura 2 los frascos y las escobillas para el extendido en base líquida y para la prueba de captación de híbridos. En la figura 3 se esquematiza el procedimiento para la toma y almacenamiento de la muestra.
Figura1 Figura 2
  Figura 3
 
El Consenso 2001 para el manejo de las mujeres con anormalidades citológicas :
De acuerdo con la última reunión del grupo del Sistema de Bethesda (consenso 2001 del Sistema de Bethesda 8) se recomienda el estudio del Papiloma Virus Humano en aquellas pacientes con diagnóstico de ASC-US: células anormales de significación indeterminada, o en las pacientes con ASC-H: ASC-US sin poder excluir lesión escamosa intraepitelial de alto grado. La figura 4 esquematiza el procedimiento a seguir, según los lineamientos del consenso, para el manejo clínico de las pacientes.
Aquellas pacientes con ASC-US que resulten con PVH negativas sólo deberán continuar el seguimiento de rutina con un alto grado de confiabilidad, pues está demostrado que su riesgo de desarrollar cáncer cervical es muy reducido. En cambio, aquellas pacientes que resulten PVH positivas requieren ser referidas para colposcopía y de acuerdo con el resultado de ésta a otros procedimientos.
 
  Figura 4
Referencias:
1 Pisan P, Parkin DM, Bray F, Ferlay J. Estimates of the worldwide mortality from 25 major cancers in 1990. Int J Cancer 1999;83:18-29.
2 Wright TC, Kurman RJ, Ferenczy A. Precancerous Lesions of the cervix. In: Kurman RJ, ed. Blausteins's Pathology of the Female Genital Tract. New York: Springer Verlag, 1994:229-77.
3 Bosch FX, European HPV Clinical Summit Meeting, January 1998.
4 Wright TC, Kurman RJ. A critical review of the morphologic classification systems of preinvasive lesions of the cervox: the scientific basis for shifting the paradigm. Papillomavirus Rep. 1994:5:175-182.
5 Davey D, Woodhouse S, Styer P, Stastny J, Mody D. Atypical epithelial cells and specimen adequacy: current laboratory practices of participants in the College of American Pathologists interlaboratory comparison program in cervicovaginal cytology. Arch Pathol Lab Med. 2000;124:203-211.
6 The 1991 Bethesda System for reporting cervical/vaginal cytologic diagnoses: report of the 1991 Bethesda Workshop. JAMA. 1992;267:1892.
7 Zur Hausen H. Papillomaviruses causing cancer: evasion from host-cell control in early events in carcinogenesis. J Natl Cancer Inst. 2000:92:119-123.
8 Wright TC, Cox JT, Massad LS, Twiggs LB, Wilkinson EJ. 2001 Consensus Guidelines for the Management of Women with Cervical Cytological Abnormalities. JAMA. 2002;287:2120-2129.
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